کچھ قدموں میں TAE بفر بنانے کا طریقہ جانیں

TAE بفر Tris بیس، acetic ایسڈ اور EDTA (Tris-acetate-EDTA) سے بنا ایک حل ہے. یہ تاریخی طور پر ہے جس میں ڈی آر اے مصنوعات کے تجزیہات میں اگروس جیل الیکٹروفوریسس کے لئے استعمال کیا جاتا سب سے زیادہ عام بفر، پی سی آر پرسمیشن، ڈی این اے صاف پروٹوکول یا ڈی این اے کلونونگ تجربات کے نتیجے میں.

اس بفر میں کم آئنک طاقت اور کم بفیرنگ کی صلاحیت ہے. یہ بڑے (> 20 کیلو میٹر) ڈی این اے کے ٹکڑے ٹکڑے ٹکڑے ٹکڑے ٹکڑے ٹکڑے ٹکڑے ٹکڑے کرنے کے لئے یہ سب سے بہتر ہے اور اس سے زیادہ بار بار (> 4 ح) جیل چلانے کے وقت کے لئے بار بار یا دوبارہ دوبارہ تبدیل کرنے کی ضرورت ہوگی. اس کے ساتھ دماغ میں، آپ بفر کے کئی بیچوں پر غور کرنا چاہتے ہیں.

یہ سمجھا جاتا ہے کہ بفر بنانے میں آسان ہے اور اقدامات فوری طور پر کئے جاسکتے ہیں، ایک وقت میں ایک سے زائد بیچ بنانا خاص طور پر وقت سازی یا دور کرنے کے لئے مشکل نہیں ہونا چاہئے. مندرجہ ذیل ہدایات کا استعمال کرتے ہوئے، TAE بفر بنانے کے لئے صرف 30 منٹ لگنا چاہئے. یہاں کیسے ہے:

EDTA کے اسٹاک حل تیار کریں

ایک EDTA (ethylenediamine tetraacetic ایسڈ) کا حل وقت کے آگے تیار کیا گیا ہے. EDTA مکمل طور پر ایک حل میں نہیں جائیں گے جب تک کہ پی ایچ ایچ کے بارے میں 8.0 کو ایڈجسٹ کیا جائے. 0.5 ایم اے ای ڈی اے کے 500 ملٹیٹر اسٹاک کے حل کے لئے، EDTA اختیومیم نمک (93 9.2) کے 93.05 گرام وزن. 400 مللویروں کو منحصر پانی میں تقسیم کریں اور سوڈیم ہائڈروکسائڈ (NaOH) کے ساتھ پی ایچ ایچ کو ایڈجسٹ کریں. 500 ململوں کے حتمی حجم کے حل کے اوپر.

TAE کے ایک اسٹاک حل کو پکڑو

ٹائی بیس کے 242 گرام وزن (FW = 121.14) وزن اور ڈیونیوڈ پانی کے تقریبا 750 مللویروں میں اس کو پھیلانے کی طرف سے TAE کے ایک مربوط (50x) سٹاک حل بنائیں. احتیاط سے glacial ایسڈ کے 57.1 مللاٹر اور 0.5 ایم ای اے اے اے (پی ایچ 8.0) کے 100 ململ شامل. اس کے بعد، ایک لیٹر کی حتمی حجم کو حل کو ایڈجسٹ کریں. یہ اسٹاک حل کمرے کے درجہ حرارت پر ذخیرہ کیا جا سکتا ہے. اس بفر کے پی ایچ پی کو ایڈجسٹ نہیں کیا جاسکتا ہے اور تقریبا 8.5 ہونا چاہئے.

TAE کے ایک ورکنگ حل تیار کریں

1x TAE بفر کے کام کرنے کا حل آسانی سے اسٹاک کے حل کو 50x کی طرف سے منحصر پانی میں بناتا ہے. فائنل سلیکشن سنبھالنے 40 ملی میٹر ہیں. Tris-Acetate اور 1 ایم ایم EDTA. بفر ایک Agarose جیل چلانے میں استعمال کے لئے اب تیار ہے.

آپ کو بفر کے لئے کیا ضرورت ہے

TAE بفر بنانے کے بعد سے صرف ایک فوری اور آسان سیٹ ہدایات کی ضرورت ہوتی ہے، اس کے لئے ضروری مواد کی تعداد زیادہ ضرورت نہیں ہے. آپ کو صرف EDTA ڈسپوڈیم نمک، ٹراس بیس، اور گلاسیل ایکیٹ ایسڈ کی ضرورت ہوگی.

بفر بنانا مناسب طور پر پی ایچ میٹر اور انشانکن کے معیار کی ضرورت ہے. آپ 600 مللرٹر اور 1500 ململین بیکاکر یا فلاسس کے ساتھ ساتھ گریجویٹ سلنڈر کی ضرورت بھی کریں گے. آخر میں، آپ کو منحصر پانی کی ضرورت ہو گی، سلاخوں کو ہلائیں اور پلیٹیں ہلائیں.

ختم کرو

آپ کو بفر بنانے کی منصوبہ بندی کہاں ہے - اسکول کی سائٹ، ایک کام سائٹ، یا کسی اور محل وقوع میں، جیسے آپ کا گھر؟ آپ کو اس بات کا یقین کرنے سے قبل انوینٹری کی جانچ پڑتال کریں کہ آپ کے پاس TAE بفر کیلئے سب سے اوپر مواد موجود ہے.

اگر آپ کو مواد کے لئے ادائیگی کرنے کی ضرورت نہیں ہے تو، آپ کے گھر سے باہر بفر بنانے کی سفارش کی جاتی ہے. آپ ان مواد کو آسانی سے آرڈر کرسکتے ہیں جو آپ آن لائن کی ضرورت ہے یا ان کے لئے ایک خاص اسٹور دیکھیں.