فاسفیٹ بنفیر نمکین (پی بی ایس) کیسے بنائیں

فاسفیٹ کو نمکین بنانا (پی بی بی) ایک بفر کا حل ہے جو عام طور پر اموناسسٹیک کیمیکل (آئی ایچ سی) دھن کے لئے استعمال کیا جاتا ہے اور یہ اکثر حیاتیاتی تحقیق میں استعمال ہوتا ہے. پی بی ایس ایک پانی کی بنیاد پر نمک حل ہے جس میں سوڈیم ہائڈروجن فاسفیٹ، سوڈیم کلورائڈ اور بعض صورتوں میں، پوٹاشیم کلورائڈ اور پوٹاشیم ڈائیڈروجنجن فاسفیٹ شامل ہیں.

اموناسسٹکیمیکل سٹینونگ

اموناسسٹیک کیمیا خاص طور پر حیاتیاتی ؤتکوں میں مائعوں کے لئے پابند اینٹی بائیوں کے اصول کو استعمال کرتے ہوئے ایک ٹشو سیکشن کے خلیات میں پروٹین جیسے آئنجنوں کا پتہ لگانے کے عمل سے مراد ہوتا ہے. اموناؤ فلورسینٹ سٹیننج پہلا اموناسسٹکیمیکل سٹوونگ طریقہ تھا.

اینٹیجنز کو نظر آتے ہیں جب اینٹیجن اینٹی بائڈی پابند ردعمل کی وجہ سے مائکروسیسی رنگوں کا استعمال کرتے ہوئے اینٹی بائیو کے ساتھ منحصر ہوتا ہے. یہ عمل اس وقت ہوتا ہے جب یہ ایک فلوریسنٹ خوردبین کے تحت ایک مخصوص طول موج کی دلچسپ روشنی کی طرف سے چالو کیا جاتا ہے.

حل کے آلوڈورالٹی اور آئن کو سنجیدگی سے انسان کے جسم سے ملتا ہے- وہ آئوٹوٹوک ہیں.

پی بی ایس بفر کے لئے ایک ہدایت

آپ پی بی بی کو کئی طریقے سے تیار کرسکتے ہیں. کئی فارمولا ہیں. ان میں سے کچھ پوٹاشیم پر مشتمل نہیں ہے، جبکہ دیگر کیلشیم یا میگنیشیم پر مشتمل ہے.

یہ ہدایت نسبتا آسان ہے. یہ 10 ایکس پی بی ایس اسٹاک حل (0.1 ایم) کے لئے ہے. تاہم، آپ 1X سٹاک حل بھی تشکیل دے سکتے ہیں، یا اس 10X ہدایت کے ساتھ شروع کر سکتے ہیں اور اسے 1X تک ڈھونڈ سکتے ہیں. مکمل عمل تقریبا 10 منٹ لگتا ہے اور ٹائن کو بھی شامل کرنے کا اختیار بھی فراہم کرتا ہے.

آپ پی بی ایس بفر بنانے کے لئے کیا ضرورت ہو گی

• سوڈیم فاسفیٹ مونوباسک (آدراہٹ)
• سوڈیم فاسفیٹ ڈاساسک (anhydrous)
• سوڈیم کلورائد
• پیمانے پر وزن اور کشتی وزن
• مقناطیسی سٹیریو اور بار بار بار
• ایک پی ایچ کی تحقیقات جو پی ایچ ایڈ ایڈجسٹ کرنے کے لئے مناسب اور مناسب حل ہے
• 1L volumetric فلاسک
• درمیان 20 (اختیاری)

پی بی ایس بفر بنانے کا طریقہ

1. 10.9 گرام آھڈیروس سوڈیم فاسفیٹ ڈاساسک (ن 2 ایچ پی او 4)، 3.2g آھیدریس سوڈیم فاسفیٹ مونوباسک (نہ 2 پی او 4)، اور 90 گر سوڈیم کلورائڈ (نالکل). صرف 1L مایوس کن پانی کے تحت تقسیم کریں.
2. پی ایچ ایچ کو 7.4 کو ایڈجسٹ کریں اور حل 1L کے حتمی حجم تک بنائیں.
3. اگر ضروری ہو تو پی ایچ ایچ کو استعمال کرنے سے قبل 10X کو زلزلے سے بچاؤ.
4. آپ پی بی ایس حل کرسکتے ہیں جس میں 0.5 فیصد ٹائی 20 پر مشتمل ہوتا ہے جس میں 5mL ٹائن 20 سے 1L حل شامل ہے.

پی بی ایس بفر بنانے کے لئے تجاویز

آپ کے پی بی ایس حل کرنے کے بعد کمرے کے درجہ حرارت پر بفر ذخیرہ کریں.

غیر انتھائی ریگولیٹس کو متبادل کیا جا سکتا ہے لیکن آپ کو اضافی پانی انوولوں کو ایڈجسٹ کرنے کے لئے ہر ایک کے مناسب پیمانے پر دوبارہ بنانا ہوگا.

پی بی ایس بفر کا استعمال

فاسفیٹ کا نمکین بنانا بہت سے استعمال کرتا ہے کیونکہ یہ زیادہ تر خلیوں میں آلوٹونی اور غیر زہریلا ہے. یہ ذائقہ مادہ کو استعمال کیا جا سکتا ہے اور یہ اکثر خلیوں کے کنٹینرز کو کم کرنے کے لئے استعمال کیا جاتا ہے. بی بی ایس بیومومولولک کو خشک کرنے کے لۓ مختلف طریقوں میں استعمال کی جا سکتی ہے کیونکہ اس کے اندر پانی کے انوول مادہ پروٹین کے ارد گرد تیار کیا جائے گا، مثال کے طور پر. یہ "خشک" اور ایک ٹھوس سطح پر متحرک ہو جائے گا.

پی ایچ او خلیات کی تباہی کو روکنے کے لئے مسلسل اور مسلسل رہتا ہے.

پانی کی پتلی فلم جو مادہ پر پابندی کرتی ہے، اس سے انکار کردیتا ہے یا دیگر نظریاتی تبدیلیوں کو روکتا ہے. کاربوٹیٹ بفر ایک ہی مقصد کے لئے استعمال کیا جا سکتا ہے لیکن کم اثر انداز کے ساتھ.

پی بی ایس بھی ipipsometry میں پروٹین adorption کی پیمائش کرتے وقت حوالہ سپیکٹرم لینے کے لئے استعمال کیا جا سکتا ہے.