بیکٹریی ثقافت (Lyophilization) کو کیسے محفوظ کریں

منجمد خشک کرنے والی، lyophilization یا cryodesiccation بھی کہا جاتا ہے، یہ ایک منجمد مرحلے کے بغیر جانے کے بغیر ایک وانپ کو ٹھوس سے تبدیل کرنے کے لئے برف کی اجازت دیتا ہے کے بعد منجمد (اور پھر ایک خلا کے تحت رکھا) کے بعد ایک مصنوعات سے پانی کو ہٹانے کے عمل ہے. آئس (یا دیگر منجمد سالوینٹس) ایک مصنوعات سے ہٹانے کے عمل کے ذریعہ ہٹا دیا جاتا ہے اور بھوک پانی کی انوائوں کو غصے کے عمل کے ذریعے ہٹا دیا جاتا ہے.

Lyophilization کی بنیادیات

طویل عرصے تک بیکٹریال، فنگل، خمیر یا دیگر مائکروبیسزم ثقافت کو ذخیرہ کرنے کا بہترین طریقہ فریزر خشک کرنے کے عمل کا استعمال کرنا ہے. اس مختصر لیبارٹری کے طریقہ کار کو تجارتی طور پر دستیاب فریزر ڈرائر کے ساتھ شروع کیا جاسکتا ہے جو آپ کی ثقافت کو محفوظ کرے گا. کیونکہ lyophilization خشک کرنے والی سب سے زیادہ پیچیدہ اور مہنگی شکل ہے، یہ عام طور پر اعلی قیمت کے نازک، گرمی حساس مواد پر عمل محدود ہے. مادہ جو منجمد نہیں ہوسکتی ہیں عام طور پر lyophilized کیا جا سکتا ہے تاکہ ریفریجریج اسٹوریج غیر ضروری ہے.

یہ عمل تین گھنٹے کے طور پر کم از کم 24 گھنٹے تک لے جا سکتا ہے، ثقافتی ترقی کے وقت بھی شامل نہیں.

Lyophilization کے قدم بہ قدم

1. سب سے پہلے، ایک رات کی کلچر، یا لان، LB پر مائکروجنزم یا دیگر مناسب غذائی اجزاء کے اجزاء میں اضافہ.
2. اس کے بعد، وقت سے پہلے خود کار طریقے سے کھودنے والی بازی کی ٹوکری کی ٹوپیوں کو تیار کریں، کیپز (ربر اسٹاپرز) کے ساتھ اوپر سے اوپر کھڑے ہوئے. autoclaving سے پہلے ٹیبلز کے اندر ثقافت کی شناخت کے ساتھ چھپی ہوئی کاغذ لیبلز رکھیں. متبادل طور پر، سٹریلٹی کے لئے تیار کیپ کے ساتھ ٹیوبیں استعمال کریں.
3. پلیٹ پر 4 ایم ایل lyophilization بفر شامل کریں. اگر ضرورت ہو تو، خلیات شیشے کا گلاس چھڑی کا استعمال کرتے ہوئے معطل کیا جا سکتا ہے.

1. فوری طور پر نسبندی شیلیوں میں ثقافت معطل کو منتقل. فی گھنٹہ تقریبا 1.5 ملی میٹر شامل کریں. ربر کی ٹوپی کے ساتھ سیل.
2. سیلسیس فریزر میں سیالوں کو رکھنے کی طرف سے شیلیوں کے اندر ثقافت کی معطلی کو منجمد کریں.
3. ایک بار جب ثقافتیں منجمد ہوجائے گی تو اسے تبدیل کرنے سے فریزر ڈرائر تیار کریں اور مناسب درجہ حرارت اور خلا کے حالات کو مستحکم کرنے کے لئے وقت کی اجازت دے. اس کا استعمال فریزر ڈرائر کے مخصوص برانڈ کے لئے کارخانہ دار کے ہدایات کے مطابق کرو.
4. احتیاط سے، اور aseptically، vials کے اوپر سب سے اوپر پر شیشے کیپسوں، تاکہ منجمد منجمد منجمد عمل کے دوران فرار ہو سکتے ہیں، اور واشر ایک فریزر ڈرائر چیمبر میں جگہ لے سکتے ہیں. مینوفیکچررز کے ہدایات کے مطابق ویکیوم چیمبر پر لاگو کریں.
5. کلچر کا وقت مکمل طور پر lyophilize (خشک کرنے کے لئے) کی اجازت دیں. یہ ہر ایک نمونہ کی حجم اور آپ کے پاس کتنی نمونے پر منحصر ہے رات کے چند گھنٹے تک لے جا سکتے ہیں.
6. مینوفیکچررز کے ہدایات کے مطابق فریزر ڈرائر چیمبر سے نمونے کو ہٹا دیں اور فوری طور پر ربڑ کی ٹوپیاں کے ساتھ شیلیوں کو مہر کر دیں، اس کے بعد کرمپ سب سے اوپر.
7. کمرے کے درجہ حرارت پر لیوفائلائزڈ کلچر جمع.

آپ کی ضرورت ہوگی

• منجمد ڈرائر
• غذائی اجزاء یا دیگر مناسب اگلے پلیٹوں (اور ثقافت کو بڑھانے کے لئے انکیوٹر)
• گلاس چھڑی
• Lyophilization بفر
• ربر اسٹاپرز کے ساتھ Crimp-top vials (اور ٹوپیاں لاگو کرنے کے لئے ایک crimper)
• فریزر

_{حوالہ:ایس پی سائنسی منجمد خشک کرنے والی بنیادی اصول. http://www.spscientific.com/freeze-drying-lyophilization-basics/}