ڈی این اے کی منظوری کے لئے تکنیک

بایو ٹکنالوجی کا میدان مسلسل تبدیلی میں سے ایک ہے. جدید تحقیق کی تیز رفتار ترقی اور ترقی سائنسدانوں کی تخلیق اور تخلیق پر مبنی ہیں اور بنیادی انوکیولک ٹیکنالوجی میں ممکنہ طور پر دیکھنے کی صلاحیت اور نئی عملوں میں لاگو ہوتے ہیں. پی سی آر کی آمد نے جینیاتی تحقیق میں کئی دروازوں کو کھول دیا، بشمول ڈی این اے کے تجزیہ اور ان کے ڈی این اے کی ترتیبوں پر مبنی مختلف جینوں کا شناخت بھی شامل ہے. ڈی این اے کی ترتیب بھی جیل الیکٹروفوریسس کو ڈی این اے کے الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ الگ استعمال کرنے کے لئے استعمال کرنے کی صلاحیت ہے.

ڈی این اے کی منظوری

1970 کے آخر میں، طویل ڈی این اے انوولوں کے لئے دو ڈی این آر ترتیباتی تکنیکوں کا انعقاد کیا گیا تھا: سنجر (یا ڈویڈویسی) کے طریقہ کار اور میکسام گلبرٹ (کیمیائی ہجوم) کا طریقہ. میکمم-گلبرٹ کا طریقہ کیمیکل کی طرف سے نیوکللیڈائڈ مخصوص خلیج پر مبنی ہوتا ہے اور اس کی ترتیب oligonucleotides (مختصر نیوکللوٹائڈ پولیمر، عام طور پر لمبائی میں بیس بیس جوڑوں کے مقابلے میں چھوٹا) ہوتا ہے. خطرہ کا طریقہ زیادہ عام طور پر استعمال کیا جاتا ہے کیونکہ یہ تکنیکی طور پر لاگو کرنے کے لئے آسان ثابت ہوتا ہے، اور، پی سی آر اور ٹیکنالوجی کے آٹومیشن کے ساتھ، آسانی سے کچھ جینوں سمیت ڈی این اے کے طویل کناروں پر لاگو کیا جاتا ہے.

یہ تکنیک پی سی آر کی قابلیت کے ردعمل کے دوران ڈیوڈیکسینکولیٹائڈز کی طرف سے چین کے خاتمے پر مبنی ہے.

خطرہ کا طریقہ

خطرے کے طریقہ کار میں، ڈی این اے کے کنارے تجزیہ کرنے کے لئے ایک ٹیمپلیٹ کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے اور ڈی این اے پولیمریس استعمال کیا جاتا ہے، پی سی آر کے ردعمل میں، پرائمروں کا استعمال کرتے ہوئے تکمیل کناروں کو پیدا کرنے کے لئے. چار مختلف پی سی آر کے رد عمل مرکب تیار کیے جاتے ہیں، جن میں سے ہر ایک پر مشتمل ایک dideoxynucleoside ٹاسفاسفیٹ (ddNTP) analogs چار نیوکلیوٹائڈز (ATP، CTP، GTP یا ٹی ٹی پی) میں سے ایک ہے.

نئے ڈی این اے کی برتری کا تسلسل جاری ہے جب تک کہ ان میں سے ایک انضمام کو شامل نہیں کیا جاسکتا ہے، اس وقت جب کنڈلی پہلے ہی طے شدہ ہے. ہر PCR ردعمل کو ختم ہونے والی ڈی این اے کے مختلف کناروں کے مرکب پر مشتمل ہو جائے گا، جو نکلیوٹائڈ کے ساتھ ختم ہوتا ہے، جو اس ردعمل کے لئے ڈیویڈاک لیبل لگا ہوا تھا. اس کے بعد جیل الیکٹروفورسیسس چار ردعملوں کے چاروں الگ الگ کناروں کو الگ الگ کرنے کے لئے استعمال کیا جاتا ہے، اور اصل سانچے کی ترتیب کی بنیاد پر کیا جاسکتا ہے، جس کی بنیاد پر کناروں کو نکلیوٹائڈ کے ساتھ کیا جاتا ہے.

خود کار طریقے سے سنجیدہ ردعمل میں، پرائمر استعمال کیا جاتا ہے کہ چار مختلف رنگ فلوروسینٹ ٹیگ کے ساتھ لیبل لگایا جاتا ہے. پی سی آر ردعمل، مختلف ڈیوڈکسینولیوٹائڈز کی موجودگی میں، مندرجہ بالا بیان کئے گئے ہیں. تاہم، اگلا، چار ردعمل مرکب پھر مشترکہ ہیں اور ایک جیل کی واحد لین پر لاگو ہوتے ہیں. ہر ٹکڑے کا رنگ لیزر بیم کا استعمال کرتے ہوئے پتہ چلا جاتا ہے اور کمپیوٹر کے ذریعہ معلومات جمع کی جاتی ہے جس میں کرومیٹگرامس ہر رنگ کے چوٹیوں کو ظاہر کرتی ہے، جس سے سانچے ڈی این اے کی ترتیب کا تعین کیا جاسکتا ہے.

عام طور پر، خود کار طریقے سے ترتیب کا طریقہ صرف ترتیبات کے لئے تقریبا 700-800 بیس جوڑوں تک لمبائی میں درست ہے. تاہم، یہ ممکن ہے کہ بڑے جینوں کے مکمل سلسلے اور حقیقت میں، پورے جینومز، مرحلے وار طریقوں جیسے پریمر واکنگ اور شاٹگن ترتیب کا استعمال کرتے ہوئے حاصل کریں.

پریمر واکنگ میں، ایک بڑے جین کا ایک قابل ذکر حصہ سورج کے طریقہ کار کا استعمال کرتے ہوئے ہے. نئے پرائمری ترتیب کے قابل اعتماد طبقہ سے پیدا ہوتے ہیں اور اصل ردعمل کی حد سے باہر جینی جین کے حصے کو جاری رکھنے کے لئے استعمال کیا جاتا ہے.

شاٹگن ترتیب میں دلچسپی کے ڈی این اے طبقہ کو زیادہ موزوں (انتظام) سائز ٹکڑے ٹکڑے، ہر ٹکڑے کی ترتیب، اور overlapping ترتیبوں پر مبنی ٹکڑے ٹکڑے کرنے کی ترتیب میں تصادفی میں شامل ہے. اس ٹیکنالوجی کو اوپریپنگ ٹکڑوں کو بند کرنے کے لئے کمپیوٹر سافٹ ویئر کی درخواست کی طرف سے آسان بنا دیا گیا ہے.