پولیمیریس چین کے ردعمل کے ذریعے ڈی این اے کی امپریشن

پی سی آر پولیمیریز چین ردعمل، ڈی این اے کے حصوں کو بڑھانے کے لئے ایک آلودگی حیاتیات کی تکنیک کے لئے کھڑا ہے، کنٹرول کے حالات کے تحت ڈی این اے پولیمر اینجیمز کا استعمال کرتے ہوئے متعدد کاپیاں تیار کرکے. جیسا کہ ڈی این اے کے حصول یا جین کی ایک ہی نقل کے طور پر لاکھوں کاپیوں میں کلون کیا جا سکتا ہے، اس کا پتہ لگانے کی اجازت دیتا ہے کہ رنگوں اور دیگر تصویری تکنیکوں کا استعمال کرتے ہوئے.

1983 میں تیار کیا گیا، پی سی آر کے عمل نے ڈی این اے کی ترتیب کو انجام دینے اور انفرادی جینوں میں نیوکللیٹائڈز کے آرڈر کی شناخت کرنے میں یہ ممکن بنایا ہے. یہ طریقہ تھرمل سائکلنگ یا ڈی این اے پگھلنے اور نقل کے لئے بار بار حرارتی اور ردعمل کا ٹھنڈک استعمال کرتا ہے. جیسا کہ پی سی آر جاری ہے، "نئے" ڈی این اے نقل و حرکت کے لئے ایک ٹیمپلیٹ کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے اور اس سلسلے میں ایک سلسلہ ردعمل کا سامنا کرنا پڑتا ہے.

پی سی آر کی تکنیکوں کو بایو ٹکنالوجی کے کئی علاقوں میں پروٹین انجینئرنگ، کلوننگ، فارنکس (ڈی این اے فنگر پرنٹنگ)، پنیرتا کی جانچ، مریضوں اور / یا انفیکچرک بیماریوں کی تشخیص، اور ماحولیاتی نمونے کے تجزیہ کے لئے بھی شامل ہیں.

فارنکس میں، خاص طور پر، پی سی آر خاص طور پر مفید ہے کیونکہ یہ ڈی این اے کے ثبوتوں میں سے بھی کم مقدار میں بھی اضافہ کرتی ہے. پی سی آر کو ڈی این اے کا تجزیہ کرنے کے لئے بھی استعمال کیا جا سکتا ہے جو ہزاروں سال کی عمر ہے، اور یہ تراکیب سب سے زیادہ دنیا بھر سے ممبئی 800،000 سالہ عمر کی ماں کی شناخت سے ہر چیز کو شناخت کرنے کے لئے استعمال کیا جاتا ہے.

پی سی آر پروسیسنگ مندرجہ ذیل ہے:

• ابتداء: یہ مرحلہ صرف ڈی این اے پالیمرسیوں کے لئے لازمی ہے جو گرم شروع پی سی آر کی ضرورت ہے. یہ ردعمل 94 اور 96 ° C کے درمیان ہوتا ہے اور 1 9 منٹ کے لئے منعقد ہوتا ہے.
• تخرکشک: اگر طریقہ کار کی ابتداء کی ضرورت نہیں ہے تو، ردعمل پہلا مرحلہ ہے. یہ رد عمل 20-30 سیکنڈ کے لئے 94-98 ° C تک گرم ہے. ڈی این اے ٹیمپلیٹ کے ہائڈروجن بانڈ رکھے جاتے ہیں اور ایک ہی بھوک لگی ہوئی ڈی این اے انوولوں کو پیدا کیا جاتا ہے.
• Annealing: رد عمل کا درجہ 50 اور 65 ° C کے درمیان ہے اور 20-40 سیکنڈ تک منعقد ہوتا ہے. ایک پریشان شدہ ڈی این اے کے سانچے پر پریمین اینونل. اس مرحلے کے دوران حرارت انتہائی اہم ہے. اگر یہ بہت گرم ہے تو، پرائمر باندھا نہیں سکتا. اگر یہ بہت سرد ہے تو، پرائمری کو بالآخر پابند ہوسکتا ہے. ایک اچھا بانڈ قائم ہوتا ہے جب پریمیر ترتیب سانچے کو ترتیب سے مل کر ملتا ہے.

• توسیع / توازن: اس مرحلے کے دوران درجہ حرارت پولیمریس کی قسم پر منحصر ہے. ڈی این اے پولیمیریس نے مکمل طور پر نئے ڈی این اے کی بھوک لگی ہے.
• حتمی حد تک: حتمی PCR سائیکل کے بعد یہ قدم 70-74 ° C پر 5-15 منٹ تک کیا جاتا ہے.
• حتمی ہولڈ: یہ قدم اختیاری ہے. درجہ حرارت 4-15 ° C پر رکھا جاتا ہے اور ردعمل کو روک دیتا ہے.

طریقہ کار تین مراحل میں تقسیم کیا جاتا ہے:

• متوقع پروموشن: ہر سائیکل کے دوران، مصنوعات (ڈی این اے کا ایک مخصوص ٹکڑا جس کا پیچھا کیا جا رہا ہے) دوگنا ہوتا ہے.
• سطح کا دورہ مرحلہ: جیسا کہ ڈی این اے پالیمریزی سرگرمی کو کھو دیتا ہے اور ریجینج استعمال کرتا ہے، ردعمل کو کم کرتا ہے.
• پلیٹیو: مزید مصنوعات جمع نہیں.